人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基訂購流程：
根據(jù)自己需要向我司說明來意;
簽訂協(xié)議并支付貨款下單;
下單并包郵送貨上門;

人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基功能：
（1）       血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）       表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）       與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
 生理變化：
（1）       主動脈硬化。
（2）       主動脈瘤
（3）       主動脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）       鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）       每凍存管細胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

2,500 U (10 x 250 U) for up to 2,500 reactions of 20 µl final volume each containing 1 U enzyme blendExpand High FidelityPLUS PCR System 2,500 U(up to 5 kb)

10 x 5 ml (for 2,000 reactions of 50 µl final reaction volume)FastStart TaqMan Probe Master

50 ml (10 x 5 ml) for up to 5,000 reactions of 20 µl final reaction volumeFastStart SYBR Green Master

2,500 U (10 x 250 U) for up to 1,000 reactions of 50 µl final volume each containing 2.6 U enzyme blendExpand High Fidelity PCR System 2500 u( up to 5 kb)

2,500 U (10 x 250 U)Taq DNA Polymerase dNTPack 250

1,000 U (4 x 250 U)FastStart Taq DNA Pol. dNTPack

720 U (2 x 360 U) for up to 190 reactions of 50 µl final volume each containing 3.75 U enzyme blendExpand Long Templ.PCR Syst. 5 to 20 kb.

3,600 U (10 x 360 U) for up to 950 reactions of 50 µl final volume each containing 3.75 U enzyme blendExpand Long Templ.PCR Syst. 5 to 20 kb.
人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基多粘類芽胞桿菌 Paenibacillus polymyxa威爾酵母 Saccharomyces willianus

人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基光帽鱗傘 Pholiota nameko

人腦動脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基MDA-MB-435(人腺高轉(zhuǎn)移細胞)

根瘤菌Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.HFF-1(人成纖維細胞)

根瘤菌 Rhizobium sp.香菇 Lentinula edodes

漢遜德巴利酵母 Enterobacter cloacea酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

苜蓿中華根瘤菌刺芹側耳 Pleurotus eryngii

人肝實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蛋白標準溶液-BSA三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

人表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基HELF(人胚肺成纖維細胞)

根瘤菌人鼻咽母系細胞

泡盛曲霉 Aspergillus awamoriHB611(人肝細胞)